母牛输精前配种员手指甲要剪短、磨钝、手臂上带上一次性塑料薄膜手套，用水或涂少量的润滑剂涂抹手臂，并将母牛外阴部周围的污垢清洗掉，再进行输精，配种员将左手五指合拢并捏成圆锥形，缓慢地伸入直肠，掏出宿粪后，隔着直肠壁探摸子宫颈位置。

采用牛用B超观察期子宫位置，并把子宫颈外端半握在左手掌的位置，让子宫颈紧贴在骨盆腔上，然后左手配合右手将装有精液的输精枪以35-45度倾斜向上从阴门插入阴道，向上斜插入5-12cm主要是避开尿道口，输精管再向前水平插入直抵子宫颈外口，呈螺旋形活动向前插入子宫颈内，当输精枪感觉穿过2-3个子宫颈内横行皱褶时，即可开始缓慢输精。

输精时做到轻插、适深、慢注、慢出。输完抽出输精枪后，左手再稍微紧握一下子宫颈，防止输精枪抽出时精液发生倒流。在操作时要特别注意:把握子宫颈时手掌位置，不能太靠前，也不能太靠后，否则都不好将输精枪头插入子宫颈内，

采用牛用B超来进行引导。在输精时母牛骚动不安，这时输精枪不能握得太紧，应随牛后躯摆动而摆动。输精枪插入阴道和子宫时要边活动边向前插，不可强制用力过大向前插，防止输精枪插伤粘膜引起子宫穿孔，使用牛用B超观察是很有必要的。

直肠握法输精的优点:操作简单、方便、安全，母牛在输精时没有痛疼刺激，初配牛也适用，输精时比较安静，不会造成阴道粘膜损伤，不会被细菌感染，对牛没有任何损伤，可以在牛用B超观察下进行。主要还是精液能够全部直接输入子宫深部，并且精液不会发生倒流，受胎率比用开腔器要高10%以上。